Pull-Down是體外驗證蛋白與蛋白互作關系的分子生物學實驗技術之一。該技術主要原理是將GST融合蛋白作為誘餌蛋白,其可與固定在固相支持物上的GSH(谷胱甘肽)結合,與蛋白樣品或細胞/組織裂解液共孵育,即可捕獲樣品中與誘餌蛋白互作的蛋白。接著通過洗滌或洗脫過程去除其余物質(zhì),并將捕獲的蛋白回收,進行WB或質(zhì)譜等檢測分析,從而證實兩種蛋白間的互作關系或純化出相應的目的蛋白。

Pull-Down技術可以通過體外分析出蛋白與蛋白之間的互作關系;可以與酵母雙雜交以及BiFC結果相互驗證;亦可用于未知蛋白的鑒定。
客戶提交實驗詳細信息(驗證蛋自的ORF序列,蛋白結構等)—對客戶提交信息和材料的確認—構建候選蛋白加標簽的原核表達載體—收集和純化候選蛋白—混合和分離候選蛋白—Western Blot檢測—撰寫提交實驗報告。
(1)提供目標蛋白原核表達載體序列信息;
(2)蛋白的收集和純化詳細實驗步驟;
(3)候選蛋白混合與分離的詳細實驗步驟;
(4)Western Blot檢測結果。